自體T淋巴細胞免疫治療已列為正式臨床治療項目,，T細胞的體外誘導(dǎo)及免疫治療技術(shù)已趨于成熟,，并取得良好的臨床療效,，然而成功有效的過繼性免疫治療關(guān)鍵在于獲得足量,、高活性的免疫效應(yīng)細胞,。有學(xué)者認為,，免疫治療成功的關(guān)鍵之一是要獲得足夠數(shù)量和質(zhì)量良好的T細胞,。因腫瘤病人往往免疫系統(tǒng)受抑,，細胞免疫功能低下,，取自患者的PBMNC  液氮罐

在數(shù)量和質(zhì)量上給體外擴增免疫效應(yīng)細胞帶來了困難，這是目前臨床上常見的現(xiàn)象,，影響了療效,。另外，免疫細胞需多次輸注才能達到較好的治療效果,，多數(shù)醫(yī)療單位利用血細胞分離機采集單個核細胞,，而這種采集方法價格昂貴,，多次采集給患者帶來心理及身體的痛苦。

在免疫細胞療法技術(shù)成熟的今日,，如果能預(yù)先儲存健康的免疫細胞,，在日后有需要時加以應(yīng)用，不但可以實踐疾病預(yù)防的概念,，更能提升預(yù)防醫(yī)學(xué)的價值,。PBMNC分離和凍存流程既是一種經(jīng)濟實用的獨立操作方法。Ficoll是人工分離淋巴細胞的重要環(huán)節(jié),，選用高質(zhì)量的試劑可使細胞分層集中而清晰,，能**程度獲取純凈的PBMNC。經(jīng)深低溫長期保存的PBMNC可以保持其原有的活性,，其中T淋巴細胞的增殖能力未受明顯影響,。

有研究結(jié)果顯示，凍存前細胞活力達到99.6(±0.4%)%,，淋巴細胞回收率58.4%(±6.52%),，符合臨床T細胞的體外誘導(dǎo)及培養(yǎng)的要求。含10%DMSO和右旋糖酐的凍存保護液中分別添加80%無血清培養(yǎng)液和80%自體血漿均顯示出良好的冷凍保護效果,，在-196℃液氮中保存其2年仍能夠保持89.7%±3.82%的活力,，為下一步臨床擇機實施抗腫瘤免疫效應(yīng)細胞的誘導(dǎo)、擴增以及回輸治療提供了便利條件,。建立的自體血漿冷凍保護流程亦適合凍存經(jīng)誘導(dǎo),、擴增后的免疫效應(yīng)細胞，證實使用冷凍過的外周血單個核細胞能夠定向誘導(dǎo)生成AIL細胞,，并且其擴增能力,、細胞純度和細胞毒活性均與新鮮細胞直接誘導(dǎo)生成的AIL細胞沒有明顯的差別。冷凍的外周血單個核細胞誘導(dǎo)的AIL細胞應(yīng)用于臨床腫瘤治療提供了基礎(chǔ),，可根據(jù)腫瘤患者的治療方案隨時復(fù)蘇細胞,，使現(xiàn)有的抗腫瘤免疫治療方法更加靈活多變。液氮罐